1．概述
产品采用竞争法免疫层析技术，定性检测样本中的药物残留。其原理是在硝酸纤维素膜上的检测线（T线）包被抗原，在胶体金上标记相应单克隆抗体。检测时，当待检样本中不存在该药物时，胶体金颗粒层析至检测线位置时与膜上包被的抗原结合，T线显色。当待检样本中存在该药物时，会与金标特异性单克隆抗体结合，形成免疫复合物，复合物层析至检测线位置时便不会与膜上包被的抗原结合，T线不显色或显色变浅。
2．规范性引用文件
GB 31650-2019《食品安全国家标准 食品中兽药最大残留限量》
QB RTK-2501 《乳品中胶体金检测试纸条质量标准书》
QB/I 6901《Xinocler® Reader 2P胶体金读数仪作业指导说明书》
RTK-988 《乳品中β-内酰胺类&头孢氨苄检测试纸条质量标准书》
3．术语和定义
胶体金试纸条：基于免疫层析原理，通过胶体金标记抗体实现目标物快速检测的试纸条。
检测限（LOD）：试纸条可稳定检出的目标物最低浓度。
假阳性率/假阴性率：试纸条检测结果与标准方法的一致性指标。
批内差异：相同批次试纸条检测结果的变异系数。
批间差异：不同批次试纸条检测结果的变异系数。
4．技术要求
检测限值标准
单位：μg/kg
检测项目 | 位置 | 国标限量 | LOD |
头孢氨苄 | T1 | 100μg/kg | 5-7μg/kg |
阿莫西林 | T2 | 4μg/kg | 2.5-3μg/kg |
氨苄西林 | T2 | 4μg/kg | 1.5-2μg/kg |
青霉素 | T2 | 4μg/kg | 1.2μg/kg |
普鲁卡因青霉素 | T2 | 4μg/kg | 2.5μg/kg |
氯唑西林 | T2 | 30μg/kg | 3-3.5μg/kg |
苯唑西林 | T2 | 30μg/kg | 2.5-3μg/kg |
头孢喹肟 | T2 | 20μg/kg | 8-10μg/kg |
头孢噻呋 | T2 | 100μg/kg | 80ug/kg |
萘夫西林 | T2 | - | 11-13μg/kg |
双氯西林 | T2 | - | 2.5-3μg/kg |
哌拉西林 | T2 | - | 2.5-3μg/kg |
苄星青霉素 | T2 | - | 2.5μg/kg |
头孢匹林 | T2 | - | 6-8μg/kg |
头孢唑啉 | T2 | - | 35-40μg/kg |
头孢哌酮 | T2 | - | 2.5-3μg/kg |
头孢乙腈 | T2 | - | 20μg/kg |
头孢洛宁 | T2 | - | 2μg/kg |
头孢噻吩 | T2 | - | 10μg/kg |
头孢吡肟 | T2 | - | 5μg/kg |
注：
1．全脂乳粉样本需按1:8复溶后检测，检测限按液态奶标准执行。
2．乳品基质需满足脂肪（＜4.5%）或高蛋白（＜3.8%），若高于以上技术参数需要遵守胶体金检测试纸条技术规范要求检验验证，并单独出具适应性说明。
3．上述未验证基质使用前必须进行验证试验，否则检测结果无效。根据实际需求验证后方可使用，不作为强制验证需求。
5．操作方法
5.1 实验前请先仔细阅读操作说明书。使用前将本试纸条和待测样本恢复至室温。
5.2 从原包装中取出试剂桶，打开后取出所需数目的微孔试剂和试纸条，并做好标记。请在60min内尽快使用。检测试剂取出后，请立即盖好试剂桶盖。
5.3 用微量移液器吸取200μL待测样本溶液于微孔中，缓慢抽吸且充分与微孔中试剂混匀。
5.4 40±0.5℃孵育3min后，将标记好的试纸条插入微孔中，使之充分浸入溶液中。再次40±0.5℃孵育5min后，取出试纸条并根据示意图30秒内判定结果，其他时间判定无效。